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让我们一起来了解一下温轮胶的制备方法吧

发布时间:2020-08-18   点击次数:25次
  今天让我们一起来了解一下温轮胶的制备方法吧
 
  温轮胶的制备方法,包括发酵步骤,是将温轮胶的生产菌种接种于含有 碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行发酵,发酵过程是在温度为29 ℃、pH为6.2-6.7的条件下进行需氧发酵,该方法的生产菌种选用鞘氨醇单 胞菌(Sphingomonas sp)CGMCC1561,对发酵终产物进行提取得到温轮胶。
 
  发酵过程包括下列工艺步骤:
 
  A、将原始菌种制成斜面菌种;
 
  B、将A步骤中制备的斜面菌种经扩大培养制成种子液;
 
  C、将B步骤中制备的种子液按种子液:发酵培养基为8%的接种量接入 发酵培养基接入发酵培养基进行发酵,其中发酵培养基包括下列组分(g/L):
 
  淀粉(水解糖)3.6 豆粕粉0.26 硝酸铵0.18
 
  硫酸镁0.09 磷酸氢二钾0.11 碳酸钙0.11
 
  微量元素0.001-0.0015
 
  发酵中培养温度为29℃、pH6.2-6.7、通风量为0.15-1vvm、发酵周期 为72小时。
 
  所述的A步骤中斜面菌种的制备过程中的培养基包括下列组分(g/L):
 
  蔗糖1-1.2 酵母膏0.25-0.3
 
  蛋白胨0.1-0.15 琼脂2-2.2 消泡剂0.07-0.1
 
  培养基的pH为6.2-6.7。
 
  扩大培养包括一级扩大培养和二级扩大培养,将斜面菌种接入一级扩大 培养的培养基经发酵制成一级种子,其中一级扩大培养中培养基包括下列组 分(g/L):
 
  蔗糖1.1 酵母膏0.28
 
  蛋白胨0.13 消泡剂0.07-0.1
 
  培养基的pH为6.2-6.7、接种量为1-2%、培养温度为29℃、通风量为 0.12-0.2vvm、发酵周期为26小时。
 
  二级扩大培养是将一级种子接入二级扩大培养的培养基经发酵制成二级 种子,二级扩大培养中的培养基包括下列组分(g/L):
 
  蔗糖0.85-1 淀粉0.2-0.25 硫酸铵0.15-0.2 豆粉0.15-0.2
 
  磷酸氢二钾0.1-0.15 磷酸二氢钾0.04-0.05 硫酸镁0.01-0.15
 
  消泡剂0.07-0.1
 
  培养基的pH为6.2-6.7、接种量为8-10%、培养温度为25-36℃、通风量 为0.12-0.2vvm、发酵周期为20-24小时。
 
  对发酵终产物进行提取得到温轮胶包括如下工艺步骤:
 
  (1)第一次预处理:将发酵液搅拌升温至65℃保温,降低至室温;
 
  (2)第二次预处理:将经过第一次预处理后的发酵液中加入凝胶处理剂, 反应40分钟后,调整pH至3.8反应40分钟至发酵液呈微凝胶状;
 
  (3)萃取:加入萃取剂,使温轮胶呈纤维状析出;
 
  (4)过滤、洗脱色素和杂质、干燥、粉碎、筛分。
 
  步骤(1)中所述的保温时间为1小时;步骤(2)中所述的凝胶处理剂 选用氯化钙,调整pH值选用盐酸;步骤(3)中的萃取剂选用乙醇;步骤(4) 中的洗脱色素和杂质选用85%-90%的乙醇,过滤选用离心机,干燥选用真空干燥。
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